Técnica de hibridación en el Virus del Papiloma Humano (VPH)

Video explicativo sobre la técnica de hibridación empleada en la detección de VPH. Tomada de un sitio web

La hibridación in situ (HIS) es una técnica molecular que permite detectar directamente el ADN del VPH dentro de células o tejidos sin necesidad de extracción. El proceso inicia con la desnaturalización del ADN celular para separar las hebras. Luego se aplicarán sondas específicas marcadas que se unirán (hibridarán) a secuencias del VPH si están presentes. Estas sondas pueden estar marcadas con fluorocromos (FISH) o enzimas que permiten visualizar la unión bajo el microscopio. El HIS permite observar la ubicación exacta del ADN viral, especialmente dentro del núcleo celular. Es útil para detectar infecciones activas, integración del virus al genoma humano y estudiar lesiones precancerosas. 

Referencias bibliográficas

1. Premoli G, Anajulia González, Villarreal J, Percoco T, Pierina Pietrocino, Aguilera L. Virus del papiloma humano; visión actual en biomedicina. Revista ADM Organo Oficial de la Asociación Dental Mexicana [Internet]. 2020 [consultado el 10 de junio de 2025];62(6):213–24. Disponible en: https://www.medigraphic.com/cgi-bin/new/resumen.cgi?IDARTICULO=4821
2. Siti-Aishah M, I. Isahak, D. Sabil, F. Sahlan, Tahir HM, Yahya A. Detección del virus del papiloma humano mediante la técnica de hibridación in situ en verrugas vulvovaginales. Revista Malaya de Ciencias Médicas: MJMS [Internet]. [citado el 10 de junio de 2025];7(2):27. Disponible en: https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC3438005/

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Figura 1: Evidencia de la búsqueda bibliográfica.

Prueba PCR (Reacción en Cadena de la Polimerasa) para el COVID-19

Video explicativo sobre la prueba PCR en el COVID-19 con el uso de la técnica RT-PCR

Detectar el COVID-19 mediante PCR implica el uso de una técnica especializada llamada RT-PCR (reacción en cadena de la polimerasa con transcriptasa inversa). Esta prueba identifica directamente el material genético del virus (ARN) y lo amplifica para hacerlo detectable, incluso en cantidades muy pequeñas.

Tipos de muestras biológicas

Respiratorias: Hisopado nasofaríngeo, orofaringe. En casos graves, se usan muestras de esputo, aspirado endotraqueal o lavado broncoalveolar (LBA). 

La OMS sugiere combinar hisopados nasales y de garganta en un solo tubo para mejorar la precisión.

No respiratorias: Orina, heces y sangre (aunque no son las muestras más comunes).

Extracción del ácido nucleico 

1.     Se rompe la célula para liberar el ARN del virus (lisis celular).

2.     El ARN se purifica.

3.     Se transforma en ADN complementario con ayuda de una enzima llamada transcriptasa inversa.

4.     Finalmente, se amplifica y detecta mediante la PCR.

Tipo de PCR y genes implicados

Se utiliza la RT-PCR (PCR con transcriptasa inversa) o RT-qPCR, identificando ciertos genes del virus:

·        Gen E: para un primer cribado.

·        Gen RdRp y N: para confirmar el diagnóstico.

·        Otros genes como ORF1ab o S también pueden ser detectados, según el tipo de kit usado.

Tipo de resultados 

·        Positivo: se detecta ARN viral (infección activa).

·        Negativo: no se detecta ARN, pero no siempre descarta por completo la enfermedad.

Además, la prueba puede medir un valor llamado Ct (cycle threshold), que indica cuántos ciclos fueron necesarios para detectar el virus:

·        Ct bajo (<25): mucha carga viral.

·        Ct alto (>30-35): poca carga viral o etapa final de la infección.

Referencias bibliográficas: 

1. Langa LS, Sallent LV, Díez SR. Interpretación de las pruebas diagnósticas de la COVID-19. Fmc [Internet]. 2021 Mar 1;28(3):167–73. Disponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC7984870/
2. Carranza LS, Fulton, Aurora J. La PCR como prueba para confirmar casos vigentes de COVID-19. RECIMUNDO: Revista Científica de la Investigación y el Conocimiento [Internet]. 2020 [cited 2025 Jun 5];4(2):64–74. Disponible en: https://dialnet.unirioja.es/servlet/articulo?codigo=7591562

Figura 1: Evidencia de la búsqueda bibliográfica